三、稀釋方法

1. 體積比稀釋
   • 示例：將10 mL標準PBS加入90 mL去離子水，得到1:10稀釋液。
   • 工具：使用移液器或量筒精確量取，避免污染。
2. 質量體積比稀釋
   • 適用場景：需精確控制NaCl濃度時（如配制0.01 M磷酸鹽 + 0.014 M NaCl）。
   • 計算：根據目標濃度計算所需NaCl質量（如0.014 M × 58.44 g/mol × 1 L = 0.818 g NaCl/L）。
3. 分步稀釋
   • 步驟：先稀釋磷酸鹽濃度，再調整NaCl濃度（如需同時降低兩者）。

四、稀釋后驗證

1. pH測量
   • 稀釋可能改變pH，需用pH計重新測定并調節至目標值（如7.4）。
   • 調整方法：滴加濃鹽酸（降低pH）或氫氧化鈉（升高pH）。
2. 滲透壓檢測
   • 使用滲透壓計驗證稀釋液是否符合實驗要求（如細胞培養需280-320 mOsm/kg）。
3. 無菌性檢查
   • 若稀釋后用于細胞實驗，需通過濾膜過濾（0.22 μm）或高壓滅菌確保無菌。

五、注意事項

1. 避免反復凍融
   • 稀釋后的PBS應分裝保存，避免反復解凍導致pH或滲透壓變化。
2. 兼容性測試
   • *次使用稀釋液時，需進行預實驗驗證其對細胞活性或實驗結果的影響（如MTT實驗檢測細胞毒性）。
3. 標記與記錄
   • 稀釋液需明確標注濃度、pH、配制日期及滅菌狀態，避免混淆。
4. 特殊實驗需求
   • 透皮吸收實驗：可能需稀釋至與接收液成分一致（如含4% BSA的PBS）。
   • 蛋白質電泳：需使用無NaCl的磷酸鹽緩沖液（如Tris-Glycine系統）。