MDCK [NBL-2]（犬腎上皮細(xì)胞）
別稱：Madin-Darby Canine Kidney (NBL-2) Cells；NBL-2；MDCK (NBL-2)

種屬與組織來源

• 物種：家犬（Canis lupus familiaris）

• 組織來源：成年雌性英國(guó)小獵犬腎臟（1958年分離自外觀正常的個(gè)體）

• 細(xì)胞類型：自發(fā)永生化上皮細(xì)胞

細(xì)胞特性與生物學(xué)特征

1. 生長(zhǎng)特性：貼壁依賴性生長(zhǎng)，典型上皮細(xì)胞樣形態(tài)（多角形，緊密連接成單層）

2. 功能特征： 

• 角蛋白免疫過氧化物酶染色陽(yáng)性，明確上皮來源；

• 廣泛用于病毒學(xué)研究（如流感病毒、冠狀病毒培養(yǎng)）、藥物跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)模型及極性細(xì)胞功能分析；

• 在β-淀粉樣蛋白前體加工及蛋白水解產(chǎn)物研究中具有重要應(yīng)用價(jià)值。

3. 生物安全等級(jí)：BSL-1（基礎(chǔ)安全級(jí)別，適用于常規(guī)實(shí)驗(yàn)室操作）

質(zhì)量控制與鑒定

• 純度驗(yàn)證：上皮細(xì)胞標(biāo)志物（如E-cadherin、角蛋白）陽(yáng)性表達(dá)；

• 無菌檢測(cè)：無細(xì)菌、真菌、支原體、HIV-1、HBV、HCV污染；

• 穩(wěn)定性：傳代后保持典型形態(tài)與功能特性，可穩(wěn)定擴(kuò)增。

培養(yǎng)指南

• 推薦培養(yǎng)基：MEM（ATCC改良配方，貨號(hào)PM150467）+10% FBS（貨號(hào)164210）+1%青霉素-鏈霉素（P/S，貨號(hào)PB180120）

• 培養(yǎng)條件：37℃，5% CO?，飽和濕度；氣相環(huán)境為95%空氣+5% CO?

• 換液頻率：每2-3天更換新鮮培養(yǎng)基

• 傳代操作：推薦1:2至1:4比例傳代，使用0.25%胰蛋白酶（含EDTA）消化

• 凍存條件：凍存液配方為55%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% DMSO，液氮長(zhǎng)期保存

應(yīng)用與研究?jī)r(jià)值
MDCK [NBL-2]細(xì)胞是病毒學(xué)、藥理學(xué)及細(xì)胞生物學(xué)研究的經(jīng)典模型，尤其適用于：

• 病毒復(fù)制機(jī)制研究（如流感病毒宿主適應(yīng)性、抗病毒-藥物篩選）；

• 藥物跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)模型（極性上皮細(xì)胞屏障功能分析）；

• 阿爾茨海默病相關(guān)β-淀粉樣蛋白代謝研究。

保藏與來源信息

• 保藏機(jī)構(gòu)：ATCC（CCL-34, CRL-6253）、ECACC（84121903, 85011435）

• 分離歷史：由S. H. Madin與N. B. Darby于1958年首-次建立，為最早的自發(fā)永生化犬腎細(xì)胞系之一。