肝炎病毒感染、酒精性或非酒精性脂肪性肝炎和膽道梗阻都會(huì)造成慢性肝損傷，使肝臟發(fā)生病理性的纖維化，進(jìn)而誘發(fā)肝纖維化的發(fā)生，最終導(dǎo)致肝硬化和肝功能衰竭。在肝纖維化進(jìn)程中，活化的肝星狀細(xì)胞在肝臟中沉積是肝纖維化發(fā)生的中心環(huán)節(jié)。

前列腺素是由花生四烯酸經(jīng)過環(huán)氧合酶和前列腺素合成酶的連續(xù)反應(yīng)而得到的具有生物活性的脂類，其中前列腺素E2在免疫調(diào)節(jié)過程中發(fā)揮著雙重作用，這種雙重作用的產(chǎn)生或許與前列腺素E2的不同受體有關(guān)，但在肝纖維化過程中，前列腺素E2對(duì)于NK細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用并不明確。 

鑒于此，天津醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院申毓軍教授課題組最近報(bào)道了前列腺素E2受體EP3介導(dǎo)NK（natural killer）細(xì)胞粘附與殺傷肝星狀細(xì)胞，從而緩解肝纖維化的作用及機(jī)制，相關(guān)研究成果于2022年5月2日在線發(fā)表在J Exp Med， 題目為EP3 enhances adhesion and cytotoxicity of NK cells toward hepatic stellate cells in a murine liver fibrosis model。

圖1. 該研究發(fā)表于國(guó)際期刊J Exp Med

該課題組分別使用CCL4腹腔注射和膽管結(jié)扎兩種不同的手段對(duì)小鼠進(jìn)行肝纖維化造模，發(fā)現(xiàn)肝纖維化小鼠的EP3受體的表達(dá)下調(diào)，并且在NK細(xì)胞中敲降或敲除EP3受體可抑制NK細(xì)胞對(duì)于肝星狀細(xì)胞的粘附和殺傷作用，加重肝纖維化。

圖2. 使用CCL4造成小鼠肝纖維化模型，同時(shí)設(shè)置Oil對(duì)照組。在敲除EP3后顯著加重了小鼠的肝纖維化。上：HE染色，下：天狼星紅染色

同時(shí)該團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)NK細(xì)胞特異性敲除EP3受體后顯著降低了雙陽(yáng)NK細(xì)胞的數(shù)量和比例，后續(xù)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)正是雙陽(yáng)NK細(xì)胞改善了肝纖維化進(jìn)程。通過分析雙陽(yáng)NK細(xì)胞的單細(xì)胞測(cè)序結(jié)果，發(fā)現(xiàn)敲除EP3受體顯著降低了雙陽(yáng)NK細(xì)胞中Itga4的表達(dá)，進(jìn)而削弱了與肝星狀細(xì)胞的粘附殺傷過程，加重了肝纖維化進(jìn)程。

圖3. 單細(xì)胞測(cè)序結(jié)果顯示，敲除EP3后降低了CD11b+CD27+雙陽(yáng)NK細(xì)胞中粘附基因Itga4、Tln1、Dock2、Itgb1和Myh9的表達(dá)

另一方面，通過SCENIC分析，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)錄因子Spic可能參與了EP3對(duì)于Itga4的調(diào)節(jié)作用，同樣在NK92MI細(xì)胞中Spic也受到EP3的調(diào)控作用。

圖4. EP3激動(dòng)劑Sulprostone刺激NK92MI細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄因子Spic的入核，同時(shí)EP3抑制劑L-798,106抑制了Spic的入核

最終發(fā)現(xiàn)EP3受體偶聯(lián)Gq蛋白后，激活PKC，磷酸化Spic，促進(jìn)Spic入核，增強(qiáng)對(duì)Itga4的調(diào)控作用。該研究揭示了在肝纖維化進(jìn)程中，PGE2通過EP3受體調(diào)控NK細(xì)胞，促進(jìn)與肝星狀細(xì)胞的粘附殺傷過程，表現(xiàn)出抗纖維化的作用，在NK細(xì)胞中激活EP3可能成為新的治療肝纖維化的策略。

圖5. 文章通路圖